Alcalóideach tábhachtach is ea citisín (ar a dtugtar baptitoxine freisin) a bhaintear as plandaí léagúmacha mar *Sophora alopecuroides* agus *Thermopsis lanceolata*. Úsáidtear go forleathan é i réimsí lena n-áirítear cógaisíocht, cosaint plandaí, agus gníomhairí bitheolaíocha; cinneann íonacht an táirge go díreach a éifeachtúlacht feidhmithe agus comhlíonadh rialála. Faoi láthair, déantar modhanna tionscail chun íonacht cistisín a thástáil a chatagóiriú i dtrí chineál bunaithe ar chruinneas, ar chostas agus ar chás iarratais: tástáil cháilíochtúil thapa, tástáil chainníochtúil ghnáthamh, agus ard-chinntiú cainníochtúil cruinneas. Tá modhanna éagsúla oiriúnach do fhoirmeacha samplacha éagsúla, mar shampla sleachta amh, táirgí críochnaithe tionsclaíocha, agus caighdeáin tagartha. Leagann an méid seo a leanas amach nósanna imeachta tástála tionscail comónta agus príomhphointí.
I. Crómatagrafaíocht Thana-Ciseal (TLC): Scagadh cáilíochtúil mear, oiriúnach do réamhthástáil ar tháirgí amh
Is é TLC an modh scagtha tapa is coitianta a úsáidtear le linn táirgeadh agus eastóscadh cistisín. Tá sé simplí oibriú agus-éifeachtach ó thaobh costais, ag fónamh go príomha chun láithreacht cistisín a chinneadh agus réamh-mheasúnú a dhéanamh ar eisíontais. Tá sé oiriúnach le haghaidh scagadh tosaigh íonachta ar eastóscáin amhábhar agus ar tháirgí amh ach ní féidir cainníochtú beacht a bhaint amach.
Nós imeachta lárnach oibríochta: Ar dtús, ullmhaigh pláta TLC glóthach shilice alcaileach trí Glóthach Silice G a mheascadh le tuaslagán hiodrocsaíde sóidiam i greamaigh; scaipeadh é go cothrom, é a ghníomhachtú ag 105 céim ar feadh uair an chloig, agus lig dó fuarú le húsáid. Ansin, tuaslaig an sampla atá le tástáil agus an caighdeán tagartha cítisine i meatánól chun réitigh tástála agus réitigh tagartha a ullmhú ag tiúchana cuí, ansin iad a fheiceáil ar an pláta TLC. Úsáid córas tuaslagóir de bheinséin-aicéatón-aicéatáit eitile-meatánól (4:2:1:1) mar oibreán forbraíochta agus lig d’éadan an tuaslagóra dul suas go dtí airde réamhshocraithe. Ar deireadh, bain an pláta, lig dó aer-triomú, agus spraeáil le himoibrí Dragendorff modhnaithe (iaidíd biosmat photaisiam) le haghaidh léirshamhlú.
Léiriú toraidh: Tar éis léirshamhlú, breathnaigh suíomh agus soiléireacht na spotaí. Taispeánann sampla comhlíontach spota a bhfuil dath aonfhoirmeach air agus gan aon spotaí seachtracha suntasacha ann, agus luach Rf ag teacht leis an gcaighdeán tagartha (tá luach Rf caighdeánach an tionscail thart ar 0.23). Léiríonn cuma spotaí seachtracha, fuíll, nó diall suntasach sa luach Rf ábhar ard eisíontais agus teip ar chaighdeáin íonachta a chomhlíonadh. Tá srianta suntasacha ag baint leis an modh seo: ní thairgeann sé ach anailís cháilíochtúil nó leathchainníochtúil, ní féidir leis luachanna íonachta sonracha a chinneadh go beacht, agus tugann sé torthaí an-mhíchruinn do shamplaí a bhfuil leibhéil arda eisíontais acu.
II. Crómatagrafaíocht Leachtach Ardfheidhmíochta (HPLC): An tionscal-modh cainníochtúil caighdeánach atá oiriúnach do tháirgí críochnaithe tionsclaíocha
Is é HPLC an modh caighdeánach faoi láthair chun íonacht chitisín amhábhar tionsclaíoch de ghrád agus de thráchtála a thástáil. Cuireann sé ardchruinneas agus atáirgtheacht ar fáil, rud a ligeann do luachanna íonachta sonracha a chinneadh go cruinn. Tá sé oiriúnach do tháirgí scagtha a bhfuil íonacht níos mó ná 90% acu agus feidhmíonn sé mar phríomh-mhodh le haghaidh rialú cáilíochta corparáidí agus tástáil mhargaidh tríú páirtí.
Coinníollacha crómatagrafacha caighdeánacha an tionscail: Úsáidtear colún C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm). Is éard atá sa chéim shoghluaiste ná córas a chuimsíonn tuaslagán fosfáite déhidrigine sóidiam 0.05 mol/L, meatánól, agus sárchlóráit amóiniam (15 mL : 85 mL : 0.5 g). I measc na bparaiméadar oibriúcháin tá ráta sreafa seasta de 1.0 mL/min, tonnfhad braite de 305 nm, teocht colún 25 céim, agus toirt insteallta 10 μL. Faoi na coinníollacha seo, tá an buaic cítisine siméadrach le dea-réiteach, ag scaradh go héifeachtach neamhíonachtaí alcalóideach coitianta.
Nós imeachta praiticiúil tástála: Ar an gcéad dul síos, ní mór réamhchóireáil samplach-samplaí soladacha a thriomú ag 105 céim ar feadh 4 huaire an chloig chun meáchan seasmhach a dhíchur chun trasnaíocht taise a dhíchur; tar éis a mheá beacht, déantar an sampla a thuaslagadh i meatánól trí ultrasonaic, déanta suas go dtí toirt, agus scagtha trí membrane orgánach 0.45 μm. Ar an dara dul síos, ullmhaítear tuaslagáin chaighdeánacha citítín de thiúchan éagsúla a ullmhú agus a instealladh; déantar cuar caighdeánach a bhreacadh le buaic-achar ar an y-ais agus tiúchan ar an x{-ais, rud a léiríonn líneacht mhaith laistigh den raon 0.04–1.2 mg/mL. Sa tríú háit, anailís shamplach-instealladh an tuaslagán tástála, taifeadtar an limistéar buaic, agus ríomhtar an t-ábhar cistisín ag baint úsáide as an gcuar caighdeánach chun íonacht an táirge deiridh a chinneadh.
Seachnaíonn an modh seo go héifeachtach cur isteach ó eisíontais choitianta agus tugann sé torthaí le hearráid íosta, ag comhlíonadh na gceanglas go léir maidir le táirgeadh tionsclaíoch, rialú cáilíochta, agus sampláil bhaisc; feidhmíonn sé mar bhunús do thástáil íonachta ar tháirgí críochnaithe cistisín (íonacht Níos mó ná nó cothrom le 98%) ar fud an tionscail.
III. Crómatagrafaíocht Leachtach-Mais-Speictriméadracht Tandem (LC-MS/MS): Anailís rian beacht oiriúnach do mhaitrísí casta
Is modh braite ardchruinneas é LC{0}MS/MS a úsáidtear go príomha chun íonacht agus inneachar cítisín a chinneadh i samplaí casta amhail amhábhair plandaí, ullmhóidí bitheolaíocha, agus maitrísí bia. Cuireann sé cumais deighilte agus braite ar fáil i bhfad níos fearr ná HPLC caighdeánach do shamplaí ina bhfuil eisíontais chasta nó rianmhéideanna den anailít. Is minic a úsáidtear é i dtaighde eolaíoch, sannadh luacha ar tháirgí deiridh ard, agus i bhfíorú barántúlachta.
Is éard atá i gceist leis an gcroí-sreabhadh oibre ná an sampla a bhaint ag baint úsáide as aicéatóintríle aigéadaithe, agus íonú ina dhiaidh sin trí cholúin eastósctha céime soladacha (SPE) chun substaintí trasnacha amhail líocha, polaisiúicrídí, agus alcaloidí gaolmhara a bhaint. Déantar an bhrath trí úsáid a bhaint as mód Monatóireachta ar Imoibrithe Iolraí (MRM), rud a chumasaíonn difreáil bheacht idir cítisín agus neamhíonachtaí gaolmhara struchtúracha. Le teorainn an-íseal braite, déanann sé íonacht na samplaí a bhfuil cion íseal cistisín a thomhas go cruinn, rud a sháraíonn go héifeachtach an claonadh i leith trasnaíochta eisíontais a bhaineann le speictrophotiméadracht UV agus modhanna toirtmheasctha. Mar sin féin, mar gheall ar chostais trealaimh ard agus sreabhadh oibre tástála casta, níl an modh seo oiriúnach le haghaidh gnáth-thástáil bhaisc i suíomhanna mhonarcha.
IV. Calraiméadracht Scanadh Difreálach (DSC): Sannadh íonachta le haghaidh ábhar tagartha agus fíorú -táirgí ardíonachta
Is é DSC an príomh-mhodh chun luachanna íonachta a shannadh d’ábhair thagartha dheimhnithe náisiúnta agus -caighdeáin thagartha íonachta arda (Níos mó ná nó cothrom le 99.5%) de chitiisín. Cinneann sé íonacht bunaithe ar dhifríochtaí in airíonna teirmeacha agus úsáidtear go forleathan é chun íonacht na gcaighdeán tagartha deiridh agus taighde -cistisín íonachta de ghrád ard-a fhíorú, rud a léiríonn ceann de na modhanna braite is cruinne sa tionscal.
Ní éilíonn an modh seo réamhchóireáil sampla casta; ríomhann sé go cruinn ábhar neamhíonachta agus íonacht trí mhonatóireacht a dhéanamh ar athruithe ar shreabhadh teasa le linn phróiseas leá an tsampla agus na torthaí a chur i gcomparáid le teirmeagram an chaighdeáin tagartha, ag tairiscint cobhsaíocht agus cruinneas eisceachtúil. De réir na gcaighdeán náisiúnta d'ábhair thagartha dheimhnithe, ní mór go ndéanfaí sannadh luach íonachta ar ábhair thagartha cítisín trí úsáid a bhaint as meascán de mhodhanna HPLC agus DSC sular féidir paraiméadair íonachta comhlíontacha a eisiúint.
V. Modhanna braite cúnta traidisiúnta (Ag céimniú amach de réir a chéile; le haghaidh tagartha amháin)
Baineadh úsáid go coitianta as ionsú UV agus toirtmheascadh aigéid sa tionscal san am a chuaigh thart chun íonacht cistisín a chinneadh; faoi láthair, ní úsáidtear iad ach chun meastachán tapa a dhéanamh ar íonacht i-táirgí amhola de ghrád íseal. Cinneann speictreafótaiméadracht UV inneachar bunaithe ar ionsúchán ag tonnfhaid ar leith, agus braitheann toirtmheascadh ar neodrú bonn aigéid le haghaidh cainníochtaithe. Cé go bhfuil an dá mhodh simplí a oibriú agus a éilíonn infheistíocht trealaimh íosta, tá siad ag fulaingt ó míbhuntáistí suntasacha: tá siad an-so-ghabhálach do chur isteach ó eisíontais mar alcalóidigh eile, aigéid orgánacha, agus líocha, a eascraíonn i earráidí tomhais suntasacha. Dá bhrí sin, níl siad oiriúnach ach le haghaidh samplaí simplí a bhfuil leibhéil ard íonachta agus eisíontais íseal acu; gan a bheith in ann caighdeáin rialaithe cáilíochta tionsclaíochta agus comhlíonta reatha a chomhlíonadh, tá HPLC den chuid is mó tagtha ina n-ionad.
VI. Príomhghnéithe le Tástála (Cleachtais Caighdeánacha Tionscail)
1. Réamhchóireáil Samplach: Roimh an tástáil, ní mór gach sampla soladach cithisín a thriomú ag 105 céim ar feadh 4 huaire an chloig go dtí go mbaintear amach meáchan tairiseach chun an taise asaithe a bhaint; cuireann sé seo cosc ar thaise an comhábhar gníomhach a chaolú agus is cúis le léamh íonachta íseal go saorga. Ní mór ampaill ábhar tagartha caighdeánach a úsáid díreach tar éis iad a oscailt agus ní féidir iad a athshéalú lena n-athúsáid.
2. Rialú Eisíonachta: Teastaíonn íonú críochnúil ar shamplaí díorthaithe ó ghléasra chun polaisiúicrídí iarmharacha, flavonoids agus alcalóidigh eile a bhaint, rud a chuireann cosc ar eisíontais ó chur isteach ar bhuaiceanna crómatagrafaíochta agus ag cur isteach ar thorthaí tástála.
3. Roghnú Modh: úsáidtear TLC le haghaidh réamhscagadh táirgí amh; Roghnaítear HPLC le haghaidh rialú cáilíochta táirge críochnaithe tionsclaíoch; LC-Roghnaítear MS/MS le haghaidh samplaí le maitrísí casta; agus úsáidtear meascán de HPLC agus DSC chun caighdeáin arda íonachta a mheas.
Achoimre
Tá córas tionscail srathach bunaithe do thástáil íonachta cistisín. Is é HPLC an caighdeán príomhshrutha maidir le táirgeadh tionsclaíoch agus trádáil tráchtála mar gheall ar a chruinneas, a éifeachtúlacht agus a éifeachtúlacht costais. Tá TLC feiliúnach do réamhscagadh tapa, agus comhlíonann LC-MS/MS agus DSC na-riachtanais ardtástála le haghaidh samplaí casta agus caighdeáin arda íonachta, faoi seach. Tá ról sonrach ag gach modh, ag cruthú réiteach cuimsitheach le haghaidh tástála íonachta cistisín.
Shaanxi Lv Ke Chun Yuan Biteicneolaíocht Co, Teo
Ár seoladh
Huaxia Yue Domhanda, Weibin Dúiche, Baoji Cathrach, Shaanxi Cúige
Uimhir Theileafóin
+86-13571783771
R-phost
